每日生物評論 http://www.stock12580.cn 資訊 · 技術 · 知識 · 智慧 Tue, 12 Nov 2024 02:34:34 +0000 zh-CN hourly 1 https://wordpress.org/?v=5.4.16 Nature:癌癥中缺氧誘導炎癥細胞死亡的機制 http://www.stock12580.cn/mechanism-hypoxia-induced/ http://www.stock12580.cn/mechanism-hypoxia-induced/#respond Tue, 12 Nov 2024 10:30:22 +0000 http://www.stock12580.cn/?p=32786 2024年11月6日,來自美國紐約大學格羅斯曼醫學院Abhishek Bhardwaj團隊在《自然》雜志上發表了標題為“A mechanism for hypoxia-induced inflammatory cell death in cancer.”的重要工作進展,研究提出了癌癥中缺氧誘導炎癥細胞死亡的機制,低氧如何通過一種獨特的機制誘導癌細胞死亡。這項研究探討了蛋白酪氨酸磷酸酶PTP1B)與RNF213蛋白的相互作用如何在低氧情況下誘導乳腺癌細胞死亡,為針對低氧腫瘤的治療提供了新思路。

據介紹,缺氧癌癥細胞抵抗許多抗腫瘤治療,并可能導致復發。腫瘤微環境通常具有低氧或缺氧區域,癌細胞可以通過激活多種信號通路來適應這一環境。在正常氧氣水平下,低氧誘導因子(HIF1α和HIF2α)會被羥基化,并最終降解。然而,在低氧環境中,HIF因其因子穩定,進一步激活NF-κB等多種存活相關基因的表達。PTP1B位于內質網中,并參與胰島素與瘦素等信號的調控,此前研究表明,其在低氧環境下能夠通過RNF213調節癌細胞的生死。

 

研究人員之前發現蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP1B)的缺乏或抑制通過激活RNF213(一種具有多個AAA-ATPase結構域和兩個泛素連接酶結構域(RING和RZ)的大蛋白)促進人表皮生長因子受體2陽性乳腺癌癥細胞在缺氧時死亡,RNF213與煙霧病、脂毒性和先天免疫有關。

 

研究人員發現,PTP1B和ABL1/2相互控制RNF213酪氨酸磷酸化,從而控制其寡聚化和RZ結構域激活。RZ結構域普遍存在并誘導NF-κB主要調節因子CYLD/SPATA2的降解。CYLD/SPATA2水平的降低導致NF-κB活化和NLRP3炎性小體的誘導,再加上缺氧誘導的內質網應激,引發焦亡細胞死亡。與該模型一致,CYLD缺失表型,而NLRP3缺失阻斷PTP1B缺乏對人表皮生長因子受體2陽性乳腺癌癥異種移植物生長的影響。對RNF213突變體的重組研究證實,RZ結構域介導腫瘤細胞死亡。

 

總之,這一研究結果確定了一種獨特的、潛在可靶向的PTP1B-RNF213-CYLD-SPATA2通路,該通路對控制缺氧性腫瘤中的炎性細胞死亡至關重要,為RNF213調控提供了新的見解,并對煙霧病、炎性疾病和自身免疫性疾病的發病機制具有潛在意義。

 

文章來源:

Bhardwaj, Abhishek, Panepinto, Maria C. et al, A mechanism for hypoxia-induced inflammatory cell death in cancer.DOI: 10.1038/s41586-024-08136-y,Nature:最新IF:69.504

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PI3K抑制劑如何選擇:實驗需求、腫瘤類型和突變亞型 http://www.stock12580.cn/pi3k-akt/ http://www.stock12580.cn/pi3k-akt/#respond Tue, 12 Nov 2024 09:15:11 +0000 http://www.stock12580.cn/?p=32830 PI3K/AKT通路的激活在腫瘤組織發生和發展中扮演著重要的角色。一旦該通路被激活,會促使細胞周期蛋白(如Cyclin D1)的表達增加,從而加速細胞進入S期,進而增強腫瘤細胞的增殖能力。此外,激活的AKT可以降低促凋亡蛋白(如BAD、BAX)的水平,并抑制多種凋亡信號的傳導。此通路的活化還會增強糖酵解和脂質合成等代謝過程,滿足腫瘤細胞快速生長對能量和物質的需求。同時,PI3K/AKT信號還能激活血管生成因子(如VEGF),促進腫瘤微環境中的血管生成,為腫瘤細胞提供充足的氧氣和營養物質。此外,通過激活多種下游蛋白(如mTOR、NF-kB等),該通路還可以增強腫瘤細胞的運動性和侵襲性,從而推動癌癥的轉移過程。這些發現表明PI3K/AKT通路在腫瘤的發生和發展中具有復雜而關鍵的調控作用。

PI3K/AKT/mTOR通路

PI3K抑制劑是靶向PI3K/AKT/mTOR通路的藥物,通過抑制該通路,PI3K抑制劑能夠阻斷腫瘤細胞的生長信號,從而達到抑制癌細胞增殖的目的,今天我們來探討一下如何選擇合適的PI3K抑制劑來達到我們的實驗目的。

 

一、PI3K抑制劑的分類

1. 泛PI3K抑制劑

這類抑制劑能夠廣泛抑制PI3K的所有亞型(包括PI3Kα、PI3Kβ、PI3Kγ和PI3Kδ)。

  • Buparlisib (BKM120):抑制所有PI3K亞型,常用于多種實體瘤如乳腺癌和肺癌的研究。
  • Copanlisib (BAY 80-6946):一種靜脈注射的泛PI3K抑制劑,針對實體瘤和血液系統惡性腫瘤。
  • GDC-0941:一種具有良好口服生物利用度的泛PI3K抑制劑,適用于多種腫瘤模型。

2. 選擇性PI3K抑制劑

針對PI3K的某一特定亞型設計,這類抑制劑具有更好的特異性,減少對其他亞型的影響,副作用較少。主要包含PI3Kα選擇性抑制劑,PI3Kβ選擇性抑制劑,PI3Kδ選擇性抑制劑以及PI3Kγ選擇性抑制劑量。

選擇性PI3K抑制劑

3.?雙靶點抑制劑

這類藥物不僅抑制PI3K,還同時抑制mTOR(哺乳動物雷帕霉素靶蛋白),mTOR是PI3K通路的下游信號分子。這類抑制劑通過同時抑制兩個關鍵節點,能夠更廣泛地抑制PI3K/AKT/mTOR通路。

4. PI3K/mTOR不可逆抑制劑

與雙靶點抑制劑不同,這類抑制劑通過不可逆的方式結合PI3K和mTOR靶點,持久抑制這兩個通路的激活。

 

二、選擇PI3K抑制劑時的考慮因素

1. 腫瘤類型:不同腫瘤類型中,PI3K通路的激活方式不同。例如,在PIK3CA突變的腫瘤中,PI3Kα選擇性抑制劑如Alpelisib更為有效,而在免疫相關腫瘤中,PI3Kγ抑制劑如IPI-549可能更具潛力。

2. 治療靶點:如果實驗設計需要廣泛抑制PI3K通路,可以選擇泛PI3K抑制劑;如果需要針對特定亞型進行干預,選擇亞型特異性抑制劑會有更好的效果。

 

三、常用PI3K抑制劑的選擇

  • LY294002:經典的非特異性PI3K抑制劑,廣泛用于體外實驗。但由于其體內穩定性差,常用于短期實驗。
  • Wortmannin:強效的PI3K抑制劑,但毒性較大,主要用于短期的抑制實驗,較少用于長期體內實驗,可用于確認PI3K的短期抑制效果。
  • Buparlisib (BKM120):泛PI3K抑制劑,能夠抑制多個PI3K亞型,廣泛用于實體瘤模型。
  • Idelalisib (CAL-101):特異性抑制PI3Kδ亞型,主要用于血液系統癌癥。
  • Alpelisib (BYL719):選擇性抑制PI3Kα,適用于PIK3CA突變的腫瘤模型。

 

四、常見PI3K抑制劑在小鼠腫瘤模型中的參考劑量

PI3K抑制劑 給藥途徑 劑量 貨號(快速詢價)
LY294002 腹腔注射(i.p.) 10-50 mg/kg,每日一次 L-7962
Wortmannin 腹腔注射(i.p.) 0.5-2 mg/kg,隔天一次 BGT-CRS-07015
Buparlisib (BKM120) 口服(Oral) 20-50 mg/kg,每日一次 MDK-204690-200.0mg
Idelalisib (CAL-101) 口服(Oral) 50-150 mg/kg,每日一次 APE-A3005-5
Alpelisib (BYL719)
口服(Oral) 25-75 mg/kg,每日一次 MDK-204780-50.0mg

以上產品艾美捷都能提供,歡迎點擊貨號咨詢我們

 

綜上所述,選擇合適的抑制劑需要結合實驗需求、腫瘤類型以及PI3K突變的亞型,確保實驗結果具有更好的靶向性,能夠提高治療的精準性和有效性。

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TopoGEN代理艾美捷科技-DNA拓撲異構酶研究 http://www.stock12580.cn/topogen-amyjet/ http://www.stock12580.cn/topogen-amyjet/#respond Mon, 11 Nov 2024 11:17:09 +0000 http://www.stock12580.cn/?p=32845

TopoGEN代理logo 艾美捷美國TopoGEN創立于1991年, 專業提供拓撲異構酶試劑和分析試劑盒,他們的藥物篩選試劑盒可用于鑒定拓撲異構酶靶向分子,用于癌癥化療和抗菌應用。TopoGEN還可提供檢測和定量原核(DNA回旋酶,拓撲異構酶IV)和真核拓撲異構酶(拓撲異構酶I,IIa,IIb,III)的檢測試劑盒,以及全系列的 DNA 底物和 DNA 切割靶標、拓撲異構酶抑制劑、拓撲異構酶抗體和試劑盒補充試劑,DNA修復的相關系列產品也是他們產品的特色產品。

拓撲異構酶抑制劑、拓撲異構酶抗體

 

拓撲異構酶(topoisomerase)是指通過切斷DNA的一條或兩條鏈中的磷酸二酯鍵,然后重新纏繞和封口來改變DNA拓撲結構的酶,其在DNA復制、轉錄、染色體分離和重組中發揮重要作用。DNA拓撲異構酶普遍存在于細菌、古細菌和真核生物中。大部分細胞都含有兩種主要形式的拓撲異構酶,I型拓撲異構酶在DNA中進行單鏈切割,II型拓撲異構酶切割雙鏈DNA。與拓撲異構酶Ⅱ相比,拓撲異構酶Ⅰ不需要ATP。DNA拓撲異構酶是幾種已批準的和實驗性的抗癌藥物的重要靶點。

拓撲異構酶(topoisomerase)

1.?拓撲異構酶和DNA回旋酶

拓撲異構酶
貨號 名稱 說明
TG2000EC E.?coli Topoisomerase IV Enzyme

大腸桿菌IV型拓撲異構酶

腸桿菌拓撲異構酶IV(top4)是一種II型拓撲異構酶,TopoGEN提供純化的Top4,用于藥物開發和篩選實驗的各個方面。該酶在解鏈動粒DNA(kDNA)方面非?;钴S,但也會使超螺旋質粒DNA松弛。然而,其在松弛活性方面較為脆弱。
TG2005H-RC Human Topoisomerase I Enzyme

人I型拓撲異構酶

高純度、具有催化活性的Top1酶在桿狀病毒系統中過表達并純化至單條帶均質性。這些制劑比從人體組織中提取的天然拓撲I便宜,并且提供了卓越的純度和高特異性活性。
TG2000H Human Topoisomerase IIα Enzyme

人IIα型拓撲異構酶

專有方法來純化人拓撲異構酶IIα(Top2a)。純化的酶完全無污染和核酸酶。它以兩步的方式改變一個獨特拓撲異構體的鏈接數,SDS-PAGE上檢測到的主要多肽為170kda。
TG2005H-Y723F Mutant Human Topoisomerase I

突變的人I型拓撲異構酶

催化活性缺失的突變型人拓撲異構酶I,該酶經過純化達到均質性(SDS-PAGE上單條帶)。突變是活性位點酪氨酸(已更改為苯丙氨酸)的單一殘基變化。這種制劑在桿狀病毒中過表達,并通過親和純化在SDS-PAGE上呈現為100kda的單條帶。該酶不能松弛DNA(但仍然可以與DNA結合)并含有一個短的(6個殘基)組氨酸標簽。
DNA回旋酶
TG2000G Coli DNA Gyrase Enzyme

大腸桿菌DNA回旋酶

高純度的大腸桿菌DNA回轉酶作為全酶提供(包含a,b亞基)。這是體外超旋質?;蛐滤幒Y選的優良試劑。
TG2000GSA Staph aureus DNA Gyrase Enzyme

金黃色葡萄球菌DNA回轉酶

高純度的金黃色葡萄球菌DNA回轉酶是一種由金黃色葡萄球菌中的兩個基因GyrA和GyrB編碼的II型拓撲異構酶。DNA回轉酶是一種必需的拓撲異構酶,它通過鏈斷裂/再連接和DNA纏繞的過程使DNA超螺旋化。作為一種II型酶,旋轉酶的獨特之處在于它能夠使松弛的質粒DNA底物產生負超螺旋。金黃色葡萄球菌DNA旋轉酶也是喹諾酮類抗菌劑的靶標,這些抗菌劑通過使酶轉變為DNA損傷劑來發揮作用。

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2.?拓撲異構酶回轉酶分析檢測試劑盒

貨號 名稱 說明
TG1015 Human Topoisomerase I Assay Kit

人拓撲異構酶I檢測試劑盒

用于常規檢測拓撲異構酶I的活性
TG1001 Human Topoisomerase II Assay Kit

人拓撲異構酶II 檢測試劑盒

特異性分析任何II型拓撲異構酶,無論是真核或原核,有助于II型酶的純化和表征
TG1003 Gyrase Assay Kit

DNA回轉酶檢測試劑盒

特異性檢測DNA回轉酶
TG1025 DNA Intercalator/Unwinding Kit

DNA插入劑/解旋試劑盒

確定一種化合物是否誘導DNA插層的DNA解繞特性
TG2000GKIT E. coli DNA Gyrase and Relaxed DNA Assay Kit

大腸桿菌DNA回轉酶及松弛DNA測定試劑盒

DNA回旋酶檢測,促進了回旋酶的純化和特性分析。也適用于對大規模篩選新型抗回旋酶活性劑感興趣的研究者。
TG1040-1 TopI-NucEx Kit

 

制備富含拓撲異構酶I (top1)活性的核提取物
TG1050-1 TopII-NucEx Kit 制備富集拓撲異構酶II (top2)活性的核提取物
TG1020 Human Topoisomerase ICE Assay Kit 測定內源性拓撲異構酶/基因組DNA共價復合物
TG1030 Topoisomerase II Immunoflourescence Kit 使用免疫熒光技術進行人Top2a細胞定位
TG1035 Topoisomerase II Immunoprecipitation Kit 免疫沉淀人Top2a
TG1024 Topoisomerase II Band Shift Kit 確定一種新的藥物是否對整個細胞中的內源性Top2b有活性

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3.?藥物篩選試劑盒

貨號 名稱 說明
TG2001GKIT E. coli DNA Gyrase Drug Screening Kit

大腸桿菌DNA回旋酶藥物篩選試劑盒

篩選針對回旋酶的新藥物,無論是作為界面毒物(IFPs,誘導DNA斷裂)還是催化抑制化合物(CICs,通過多種機制阻止回旋酶的作用)
TG1007 E. coli Topoisomerase IV Drug Screening Kit

大腸桿菌IV型拓撲異構酶藥物篩選試劑盒

拓撲異構酶IV藥物篩選試劑盒包含必要的試劑,以確定影響酶活性的化合物
TG1018 Topoisomerase I Drug Screening Kit

I型拓撲異構酶藥物篩選試劑盒

Top1的新型抑制劑的篩選試劑盒
TG1017 Topoisomerase I Hi-Loading Inhibition Kit 篩選阻斷人類拓撲異構酶I (topo I)催化活性的試劑(藥物,天然產物,小分子,合成物)
TG1009 Topoisomerase II Drug Screening Kit 基于切割的檢測試劑盒,可以揭示特定藥物是否拮抗拓撲異構酶II的作用或影響切割/連接循環
TG1019 Topoisomerase II Drug Screening Kit (kDNA based) 用于鑒定靶向II型拓撲異構酶作為催化抑制劑的藥物

TopoGEN產品 試劑盒

 

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CRYOLYS? EVOLUTION 用于溫度敏感樣品制備的冷卻裝置 http://www.stock12580.cn/cryolys-evolution/ http://www.stock12580.cn/cryolys-evolution/#respond Fri, 08 Nov 2024 10:36:07 +0000 http://www.stock12580.cn/?p=32797 CRYOLYS? EVOLUTION 用于溫度敏感樣品制備的冷卻裝置

讓熱敏分子保持“形狀”監控低溫可確保特定分子(如蛋白質和RNA)的完整性,使下游分析具有更好的效率和靈敏度。

Cryolys Evolution 冷卻裝置

Cryolys?Evolution是唯一一款獲得專利的集成冷卻裝置,可防止研磨過程中管內溫度升高。由于干冰的升華,提高了分子提取的效率,從而產生優質的分析結果,可持續保持研磨前和研磨過程中的溫度在0至10°C之間。得益于其巧妙的設計,Cryolys?Evolution現在成為Precellys?Evolution Touch研磨器真正的延伸搭配。該系統位于研磨器的蓋子上,由Precellys?Evolution Touch軟件直接供電和管理,在有限的工作空間內提供對樣品研磨過程中溫度的完全控制。

 

Cryolys?Evolution用于溫度敏感樣品制備的冷卻裝置

  • 高效冷卻:研磨前、中、后無需壓縮空氣和電源
  • Precellys"Evolution Touch軟件可精確監測溫度
  • 最小化所需工作空間

 

?使用步驟

CRYOLYS EVOLUTION 冷卻裝置使用步驟1 CRYOLYS EVOLUTION 冷卻裝置使用步驟2 CRYOLYS EVOLUTION 冷卻裝置使用步驟3
1.Cryolys“Evolution直接連接到專用Precellys蓋子的頂部。 2.環境空氣被吸入并在與干冰接觸的情況下冷卻。 3.然后將冷空氣噴射到Precellys的蓋子中,讓熱敏分子保持在其原始狀態。

 

 

管內溫度分布7500rpm,3x30s,30s間歇

CRYOLYS EVOLUTION 冷卻裝置管內溫度分布

技術參數

貨號 P000671-CLYS2-A
尺寸 335x335x100mm
重量 全套:2.6kg可拆莎膪楚踽諤卸冷卻模塊:1.3kg
容量 1.5kg干冰
干冰用量 每運行30分鐘1.5kg
規范 CE
噪音 <60dB
要求 放置Precellys”的工作臺;最小高度:70厘米;最小深度:70厘米

 

Bertin Instruments是Bertin Technologies集團的儀器部門,其中旗艦產品Precellys系列多功能生物樣品勻漿器是全世界各個實驗室的明星產品,截至目前累計有20000+的引文!核心產品線:1、Precellys Evolution Touch-高端多功能均質器;2、 Precellys 24 Touch 實驗室樣品研磨器;3、Minilys-適用于少量樣本處理樣品研磨器;4、Cryolys Evolution-用于溫度敏感樣品制備的冷卻裝置。

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實驗動物的性別區分、抓拿固定、采血方法、動物處死干貨分享 http://www.stock12580.cn/experimental-animal/ http://www.stock12580.cn/experimental-animal/#respond Thu, 07 Nov 2024 10:38:16 +0000 http://www.stock12580.cn/?p=32789 今天我們將針對實驗動物小鼠大鼠基礎操作做詳細介紹,包括如何區分小鼠的性別?常用到編號方法有哪些?抓拿固定小鼠大鼠的手法以及涉及實驗需求不同各個部位的采血方法動物處死方法等。

 

一、性別區分

小鼠和大鼠的性別區分主要依據生殖器官與肛門之間的距離、有無毛發覆蓋以及乳頭的明顯程度等特征。以下分別講解:

1、生殖器與肛門的距離:

雄性小鼠和大鼠的生殖器與肛門之間的距離較長,而雌性則較短。這一特征在幼齡仔鼠中尤為明顯,因為它們的外生殖器未成熟,需要通過觀察這些部位的距離來判斷性別。

2、毛發覆蓋情況:

雄性小鼠和大鼠在生殖器與肛門之間通常會有毛發生長,而雌性則沒有毛發覆蓋,兩者之間可以見到一條縱行的溝。

3、乳頭的明顯程度:

雌性小鼠和大鼠的乳頭比雄性更為明顯。

4、生殖器官:

雄性陰莖朝頭的方向突出,可輕輕擠壓包皮使其露出而確認。雌性較小時可見閉合的陰道口,擠壓亦可張開。

5、外觀:

在某些情況下,雄鼠可能比雌鼠體型稍大,但這并不是絕對的,因為體型大小還受到品種、年齡和營養狀況等多種因素的影響。

此外,新生小鼠和大鼠與成年鼠的性別區分可以參考以下建議:

(1)新生仔鼠:新生仔鼠的性別鑒定主要依靠外生殖器與肛門之間的距離。近者為雌性,遠者為雄性。

(2)成年鼠:成年雄鼠的陰囊明顯可見;雌鼠可見陰道開口且乳頭明顯。

需要注意的是,不同文獻對具體細節描述略有差異,但總體上一致認為生殖器與肛門之間的距離是最重要的鑒別標志。

 

二、編號方法

小鼠與大鼠的編號方法主要分為染色法、耳孔法剪趾法等。以下是詳細說明:

1、染色法:

使用毛筆或棉簽蘸取不同顏色的化學藥品(如苦味酸或中性紅)涂染在小鼠特定部位的毛發上,以代表不同的編號。編號次序采用九分法原則:先左后右、由前至后。此方法適用于短期實驗的小鼠,因為時間長了染料易退掉。

2、耳孔法:

使用專用的打孔器在小鼠耳朵上打孔或剪不同的缺口,用位置和孔數進行標記。一般右耳表示個位數,左耳表示十位數。具體操作包括:右耳緣內側的小孔表示1、2、3,耳緣外側的單缺口表示4、5、6;左耳則相反。對于黑色或棕色小鼠及裸鼠,可以采取特殊的編號方法,例如雙耳無孔為1號,左耳打孔為2號,右耳打孔為3號,雙耳打孔為4號。適用于短期實驗的大小老鼠,并且需要保證編號不對動物生理或實驗反應產生影響。

3、剪趾法:

斷趾法是最常見的編號方法之一,根據對新生小鼠前肢4趾和后肢5趾的切斷位置來進行編號。應切斷其一段趾骨,不能只斷趾尖,防止傷口痊愈后辨別不清楚。此方法常用于出生7天內的小鼠,并且需要在小仔5-7日齡內進行斷趾。

 

三、抓拿固定

小鼠:?習慣用右手的同學,建議使用右手抓住小鼠尾部,將其提起并放在鼠籠鐵紗網上或粗糙物上。在小鼠向前掙脫時,用左手的拇指和食指抓住其頸部皮膚,并以左手的小指和掌部夾住其尾部??粘龅挠沂诌M行后續實驗,習慣用左手的同學則相反操作。

大鼠:習慣用右手的同學,建議戴上防護手套,用右手抓住大鼠尾巴中部提起,左手按住背部皮膚??墒褂檬中g臺固定,將大鼠四肢放入手術臺松緊環內,收緊環扣以固定??粘龅挠沂诌M行后續實驗,習慣用左手的同學則相反操作。

注意事項:

1、在整個過程中應保證人身和動物的安全,避免粗暴動作,防止動物咬傷或造成應激反應。

2、捉拿和固定時要膽大心細,不可粗暴對待動物。

3、小鼠尾巴的尾端容易斷裂,抓小鼠應抓尾巴中部或根部。

4、大鼠的門齒很長,在抓取方法不當而受到驚嚇或激怒時易將操作者手指咬傷,所以,取用時應輕輕抓住其尾巴后提起。

 

四、采血

實驗動物的采血是動物實驗中常見的操作,其方式多種多樣,應根據具體實驗需求和動物福利原則選擇合適的采血方式。以下以小鼠、大鼠為例講述實驗動物的采血方式:

1、尾尖采血

這是最常用且操作簡便的方法之一。首先將小鼠固定并暴露其尾巴,通常將其浸泡在40-50℃的溫水中幾分鐘或用酒精棉球擦拭鼠尾,使血管充盈。然后用無菌手術刀快速剪去尾尖1-2mm,血液會自然流出。

2、摘眼球采血

用左手拇指、食指和中指抓取小鼠的頸部頭皮,小指和無名指固定尾巴。輕壓需要摘取的眼部皮膚,使眼球充血突出。用眼科剪剪去小鼠的胡須,防止血從胡須處留下引起溶血。用眼科彎鑷夾取眼球并快速摘取,并使血液從眼眶內流入0.5ml EP管中。

3、眼眶靜脈叢采血:

此方法適用于多次重復采血,具有成功率高、死亡率低的優點。但需要注意的是,該方法不能采集到無菌的血樣,因為血液中可能混有眼窩內的組織液和腺體分泌物。采血后需要一定的組織修復時間,一般兩次采血間隔應為10-14天。

4、心臟采血:

這種方法較為復雜,需要將小鼠麻醉后仰臥固定于動物臺上,剪去胸前區被毛,皮膚消毒。使用4-5號針頭的注射器在左側第3-4肋間心搏動最強處進針刺入心臟,緩慢回抽針筒以獲取血液樣本。

5、頸靜脈采血:

無需麻醉,直接從穿刺點進針采集血液。此方法要求操作者技術嫻熟,并且由于動物未麻醉和相應的器械固定,動物容易掙扎,增加進針難度。

6、隱靜脈采血:

常用于少量血液采集,無需麻醉。待動物固定后,在后腿外側區域剃毛后暴露采血點,用采血針刺入即可獲得血液樣本。

7、頜下靜脈叢采血:

這是一種快速、簡單且人性化的小鼠采血方法,通過面部進針點采集血液。該方法保證順利采集實驗血樣的基礎上將對動物的影響降到最低。

注意事項:

(1)操作迅速、輕柔,避免對動物造成不必要的傷害。

(2)確保每次采血前后都進行適當的止血措施,以防止出血過多。

(3)尾尖在長期反復取血的情況下,應先靠近鼠尾末端穿刺,以后再逐漸向近心端穿刺。

(4)盡量在滿足實驗要求的基礎上選擇簡單易行且對動物傷害較小的采血方法。

 

五、處死

小鼠與大鼠的處死方法多種多樣,但主要可以歸納為以下幾種:

1、頸椎脫臼法:

這是大鼠和小鼠最常用的處死方法。即使用外部力量使動物的頸椎脫臼,從而導致脊髓與腦髓斷開,使動物迅速失去生命體征。

詳細步驟如下:

(1)先將大、小鼠麻醉。

(2)用右手抓住鼠尾根部并將其提起,放在鼠籠蓋或其他粗糙面上。用左手固定枕寰關節。

(3)右手抓住鼠尾根部用力拉向后上方,快速使枕寰關節脫臼。

(4)脊髓與腦干斷離,動物立即死亡。

2、二氧化碳窒息法:

將小鼠或大鼠放入盛有二氧化碳氣體的容器中,通過替換氧氣達到窒息效果。因其使用簡便、危害小、低成本等優點被廣泛應用于小型動物的安樂死。對于犬、豬等大型動物,暴露于不斷增加濃度的二氧化碳下會引發嚴重的掙扎和痛苦,因此不適用于這些動物。

詳細步驟如下:

(1)準備干凈、透明的裝有通氣孔的密閉盒及二氧化碳鋼瓶。

(2)提供空氣或氧氣使大鼠或小鼠適應低氧的環境。

(3)持續增加CO?濃度,直到達到100%。AVMA(美國獸醫協會)要求CO?置換率為每分鐘30%-70%容器體積,以確保在引起疼痛之前,動物已失去意識。

(4)給藥后,觀察小鼠或大鼠反應。若出現呼吸或心跳停止,則二氧化碳量足夠。

(5)在動物失去生命體征后,可以通過物理方法(如氣管穿孔)確認死亡。

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MINILYS?樣品研磨器-適用于少量樣本處理樣品研磨器 http://www.stock12580.cn/minilys-sample-grinder/ http://www.stock12580.cn/minilys-sample-grinder/#respond Thu, 07 Nov 2024 09:01:23 +0000 http://www.stock12580.cn/?p=32833 Minilys?高效、靈活、易用的樣品研磨器

Minilys?是一款小巧又靈活的樣品研磨器,完全滿足樣品制備實驗室的需求。Minilys?在效率與靈活性之問提供了最佳組合。獨特的設計提供了絕佳的研磨、裂解和均質效率,以獲得DNA/RNA、蛋白質和小分子。Minilys?一次能夠處理3個2mL/0.5mL或1個7mL的任何類型樣品的處理。其用戶友好的鎖管系統使Minilys?成為任何研究實驗室的理想選擇。

Minilys 樣品研磨器

高效快速

Minilys?提供與Precellys?24 Touch和Precelys?Evolution Touch相同的珠磨技術和研磨質量,是唯一使用3D運動裂解樣本的小型研磨器。

安全易用

Minilys?可確保輕松操作和安全操作。如果蓋子在運行時沒有關閉牢固或呈打開狀態,其創新的切斷系統會自動停止操作,從而為用戶提供額外的安全保障。

產品名稱 貨號 容量
Minilys? 樣品研磨器 P000673-MLYS0-A 1-3個2mL/0.5mL研磨管;
1-31.5mL微量離心管;
17mL研磨管

用于快速裂解樣品的靈活研磨器

  • 采用3D珠磨技術的緊湊型研磨器
  • 靈活易用:兼容廣泛的樣品和參數
  • 獲取DNA/RNA、蛋白質和小分子
  • 最小的工作臺空間

 

應用范圍:

DNARNA提取、蛋白質提取、代謝產物/藥物提取

使用步驟:

Minilys樣品研磨器使用步驟1 Minilys樣品研磨器使用步驟2 Minilys樣品研磨器使用步驟3 Minilys樣品研磨器使用步驟4 Minilys樣品研磨器使用步驟5
1.在0.5、2ml或7ml研磨管中準備生物樣品 2.裝載一到三根研磨管 3.設置速度和時間 4.3D磨珠:每根研磨管的效率相同,可以充分釋放細胞成分 5.30秒內,您的樣本就可以進行分析了!

技術參數:

貨號 Minilys? 樣品研磨器
容量 1-3個2mL/0.5mL研磨管;1-31.5mL微量離心管;17mL研磨管
速度范圍 3,000、4,000或5,000rpm
循環時間 長至 240s
尺寸 L: 180mm, W: 290mm, H: 380mm
重量 7.8kg
規范 CE, FCC part 15
電源 90-250VAC/50-60Hz,Power:lkVA
噪音 <70dB

 

Bertin Instruments是Bertin Technologies集團的儀器部門,其中旗艦產品Precellys系列多功能生物樣品勻漿器是全世界各個實驗室的明星產品,截至目前累計有20000+的引文!核心產品線:1、Precellys Evolution Touch-高端多功能均質器;2、 Precellys 24 Touch 實驗室樣品研磨器;3、Minilys-適用于少量樣本處理樣品研磨器;4、Cryolys Evolution-用于溫度敏感樣品制備的冷卻裝置;

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Cell Metabolism:去甲腎上腺素誘導的游離脂肪酸釋放的抗癲癇效應 http://www.stock12580.cn/anti-seizure-effects/ http://www.stock12580.cn/anti-seizure-effects/#respond Wed, 06 Nov 2024 10:44:39 +0000 http://www.stock12580.cn/?p=32784 2024年10月31日,來自美國羅切斯特大學Maiken Nedergaard等研究人員在《細胞—代謝》雜志上發表了標題為“Anti-seizure effects of norepinephrine-induced free fatty acid release.”的研究成果,合作揭示去甲腎上腺素誘導的游離脂肪酸釋放的抗癲癇效應。

 

據了解,大腦在睡眠、安靜清醒和高度警覺狀態之間迅速過渡的能力非常顯著。大腦NE在促進清醒方面起著關鍵作用,但大腦如何避免在覺醒時出現神經元過度興奮仍不清楚。

機理模式圖

機理模式圖

 

研究人員展示了去甲腎上腺素(NE)的暴露導致來自星形膠質細胞和神經元的游離脂肪酸(FFA)在質膜內的生成。反過來,FFA通過不同程度地調節星形膠質細胞和神經元的Na+、K+、ATP酶活性來抑制興奮性。直接將FFA應用于清醒行為的小鼠的枕葉皮層,減弱了視覺誘發電位(VEP)。相反,通過局部施用脂肪酶抑制劑阻止FFA的產生則增強了VEP并引發癲癇樣活動。

 

這些結果表明,FFA的釋放是NE信號傳導中的一個關鍵步驟,可以保護大腦免受過度興奮。靶向脂質信號通路可能為癲癇預防提供了一種新穎的治療方法。因此,FFA對神經傳遞的抑制作用可能為未來開發靶向脂質信號的抗癲癇藥物提供平臺。

 

文章來源:

Baoman Li, Qian Sun, Fengfei Ding, Qiwu Xu et al, Anti-seizure effects of norepinephrine-induced free fatty acid release.DOI: 10.1016/j.cmet.2024.10.011,Cell Metabolism:最新IF:31.373

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Precellys?24 Touch 直觀的組織研磨器 http://www.stock12580.cn/precellys24-touch/ http://www.stock12580.cn/precellys24-touch/#respond Wed, 06 Nov 2024 08:59:29 +0000 http://www.stock12580.cn/?p=32817 Precellys?24 Touch 是一款非常理想的實驗室樣品研磨器,可用于制備任何種類的生物樣品,從最軟到最硬,無論其來源如何(動物組織、植物組織、微生物.)。Precellys?24Touch一次可以處理多達24個樣本,并已在1500多種不同的樣本上進行了驗證,樣本類型涵蓋;從大腦、肌肉和心臟樣本,到骨路、頭發和種子等非常堅硬的材料。

Precellys 24Touch直觀的組織研磨器

Precellys?24Touch的觸摸屏界面非常直觀,使用起來非常簡單。得益于其獨特的真空的鎖管系統及其特殊設計,Precellys'24Touch符合最苛刻的實驗室環境(如BSL3)的安全要求。

 

憑借強大的3D運動,Precelys?24Touch為研磨中的研磨珠提供高能量,使樣品在幾秒鐘(約30秒)內以4500至6800rpm的速度均勻研磨。然后,可以對樣品進行后續處理,以在專門用于DNA/RNA(PCR、電泳、NGS、芯片等)、蛋白質(印跡、質譜等)或代謝物分析(色譜等)的各種技術中進行進一步分析。

 

Precellys?24Touch直觀的組織研磨器

易于使用:觸摸屏和專用鎖管系統

高效:強大的3D運動,最高可達6,800 rpm

復性高:多種DNA、RNA和蛋白質驗證方案

高品質:堅固、符合人體工程學和安全

 

產品名稱 貨號 規格
Precellys?24 Touch 樣品研磨器 P002391-P24T0-A.0 1-24個0.5mL研磨管、1-24個2mL研磨管

 

Precellys?24 Touch 樣品研磨器 使用步驟

Precellys 24Touch組織研磨器操作步驟1
1.選擇合適的Precellys"裂解試劑盒(帶研磨珠的預裝管) 2.選擇合適的管支架,并裝載1到24個樣品 3.由專利的鎖管系統自動鎖定
Precellys 24Touch組織研磨器操作步驟2
4.在主菜單中選擇?使用?并設置參數 5.3D珠磨運動為每根管子提供相同的效率 6.在不到3分鐘,您的樣品就可以進行分析了!

*使用專利冷卻系統CryolysEvolution,保護樣品的完整性和活性,使其免受熱降解

應用范圍

DNA/RNA提取、蛋白質提取、代謝產物/藥物提取

樣品研磨器技術參數

貨號

Precellys?24 Touch 樣品研磨器

容量 1-24個0.5mL研磨管、1-24個2mL研磨管
速度范圍 4,500rpm-6,800rpm (100rpm遞增)
程序 不限
循環次數 多達 10次
循環時間 長至90秒
間歇時間 120秒
尺寸 L278mm,W 408mm, H 390mm (開蓋 515mm)
重量 23kg
規范 CE, FCC part 15
電源 90-250VAC/50-60Hz,Power:1kVA
噪音 <70dB
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Coriolis ? Compact 生物污染控制的便攜干式空氣采樣器 http://www.stock12580.cn/coriolis-compact/ http://www.stock12580.cn/coriolis-compact/#respond Tue, 05 Nov 2024 10:44:32 +0000 http://www.stock12580.cn/?p=32803

Coriolis? Compact是一種用于微生物空氣監測的干式旋風收集器。 輕便小巧,可輕松運輸,并可放置在重要位置進行室內和室外采樣。其創新的干式旋風分離技術以50 L/m的氣流抽吸顆粒并在圓錐體中離心分離,然后通過使用適當的緩沖液沖洗耗材來回收收集的顆?;蛭⑸?,因此樣品可用于多種下游分析(NGS、qPCR、培養)。

Coriolis? Compact 干式空氣采樣器

Coriolis? Compact僅需幾小時即可獲得高靈敏度和特定的結果。由于改進的電池自主性,它可以連續采樣長達8小時。 Bertin提供一次性耗材,以避免交叉污染。 與應用程序Coriolis Connect兼容,Coriolis Compact在您啟動時會被應用程序自動檢測到??刂圃谀种?,您將能夠手動或通過語音命令進行管理,并輕松注冊新協議。

便攜式干式旋風空氣采樣器-用于生物污染控制的便攜式干空氣采樣器

  • 濃縮樣品兼容任何下游分析
  • 輕巧緊湊,適用于室內和室外
  • 使用高效率,長達8小時的自主性
  • Bertin遠程控制
  • Connect應用程序

 

空氣采樣器操作步驟

空氣采樣器操作步驟:

創新的干式旋風技術

1.將圓錐體放置在器械上并鎖定

2. 吸入的空氣進入圓錐體并形成渦流

3. 空氣中的顆粒在錐體壁中離心

4. 收集的顆粒通過沖洗圓錐回收。

 

空氣采樣器應用領域:

  1. 污染與環境
  2. 生物醫學與健康
  3. 食品、制藥、獸醫行業
  4. 研究與發展
  5. 室內空氣質量

 

干式旋風空氣采樣器產品規格

尺寸 255x135x130mm
重量 1.2kg. (含電池)
采集時間 從1分鐘到8小時
溫度范圍 +5 ° C至+45 ° C,濕度范圍為10%至90%
50公升/min
收集的顆粒大小 從500 nm到10 um
收集的顆粒類型 細菌病毒霉菌
電池自主性 在20℃下運行最長8小時
藍牙連接 與Coriolis Connect兼容
去污 H202
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Precellys??Evolution Touch 樣品研磨器 http://www.stock12580.cn/precellysevolution-touch/ http://www.stock12580.cn/precellysevolution-touch/#respond Tue, 05 Nov 2024 08:51:04 +0000 http://www.stock12580.cn/?p=32815 Precellys?Evolution Touch 樣品研磨器具有最佳的堅固性、安全性、效率和靈活性,是研磨裂解樣本并提取DNA、RNA、蛋白質或小分子的完美解決方案。

Bertin Instruments Precellys?Evolution Touch

Precellys?Evolution Touch 樣品研磨器的設計是基于超過15年的樣品制備經驗以及創新和效率為導向的專業知識。該儀器獨特的8字形3D運動為每一根研磨管提供了同樣高的能量水平。全新的觸摸屏界面使其比以往任何時候都更人性化和直觀。其以安全為導向的設計和操作方案,也與L3實驗室兼容。

Precelys?Evolution Touch 樣品研磨器可以同時處理6種不同尺寸的研磨管(最多24根0.5/2mL的研磨管)。它的靈活性和高效率使用戶能夠在大約30s內研磨、勻漿或裂解來自動物、人類、植物或微生物的任何類型的軟或硬樣品。最后得到的目標樣品可以通過最苛刻的分子分析技術工作流程進行分析,如NGS、qPCR、RNAse9、質譜和液相色譜。

 

Precellys?Evolution Touch 樣品研磨器入戶美國BSL-4級別實驗室:其穩定性,自動上鎖和警報系統,提供非常好的生物安全保護!

比以往任何時候都更靈活、更直觀

安全易用:專屬觸摸屏和鎖管系統

靈活:6種研磨管規格(0.3mL、0.5mL、2mL、7mL、15mL及 50mL)

動力強勁:3D振蕩技術最高可達10000 rpm

高效:可從任何生物樣本中研磨提DNA/RNA/蛋白質

 

產品名稱 貨號 容量
樣本研磨器

Precellys?Evolution Touch

P002511-PEVTO-A.0 8-96孔300uL聯排管、1-24個2mL/0.5mL研磨管
1-12個7mL研磨管、1-6個15mL研磨管、
1-3個50mL研磨管、1-6個金屬管

 

使用步驟

樣本研磨操作步驟
1.選擇合適的Precellys"裂解試劑盒(帶研磨珠的預裝管) 2.選擇合適的管支架,并裝載1到24個樣品 3.由專利的鎖管系統自動鎖定
樣本研磨器操作步驟
4.在主菜單中選擇?使用?并設置參數 5.3D珠磨運動為每根管子提供相同的效率 6.在不到3分鐘,您的樣品就可以進行分析了!

*使用專利冷卻系統CryolysEvolution,保護樣品的完整性和活性,使其免受熱降解

應用范圍

DNA/RNA提取、蛋白質提取、代謝產物/藥物提取

技術參數

貨號 P002511-PEVTO-A.0
容量 8-96孔300uL聯排管、1-24個2mL/0.5mL研磨管
1-12個7mL研磨管、1-6個15mL研磨管、
1-3個50mL研磨管、1-6個金屬管
速度范圍 4,500rpm-10,000rpm (100rpm遞增)
程序 不限
循環次數 多達10次
循環時間 長至90秒
間歇時間 120秒
尺寸 L378mm,W515mm,H400mm (開蓋 632mm)
重量 27,2kg
規范 CE、 FCC part 15
電源 90-250VAC/50-60Hz,Power:1kVA
噪音 <70dB
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