核因子紅細胞2相關因子（Nrf2）是一種轉錄因子，它通過與抗氧化應答元件（ARE）區域的啟動子結合，增加抗氧化蛋白的表達，以協調細胞的抗氧化和抗炎反應。在正常情況下，Nrf2被細胞骨架中的Kelch樣ECH關聯蛋白1（Keap1）保留在細胞質中，并促進Nrf2的泛素化和降解。人體內的氧化和抗氧化體系通常處于動態平衡狀態。然而，當這種平衡被打破時，機體可能面臨過度氧化負荷，導致抗氧化物質耗竭或活性下降，進而使過多的活性氧自由基攻擊靶器官，對組織器官和生物大分子（如DNA、RNA、蛋白質和脂質）造成損傷。
通常情況下，Nrf2定位于細胞質，并與Keap1相互作用。在泛素化后，Nrf2被迅速降解通過泛素蛋白酶體途徑。然而，當細胞受到氧化應激時，Keap1蛋白域的結構發生變化，導致Nrf2從Keap1中釋放出來。這使得Nrf2蛋白無法被降解，從而使其進入細胞核，并結合到ARE上，誘導抗氧化應答基因的轉錄表達，以保護細胞免受氧化損傷。
研究表明，通過使用小分子抑制劑直接阻斷KEAP1-NRF2蛋白-蛋白相互作用，可以調節抗氧化基因的表達，預防正常細胞的惡變，并發揮抗癌作用。這種方法有潛力用于開發新的抗癌治療策略。
艾美捷科技作為BPS Bioscience中國區代理，為您推薦KEAP1-NRF2相互作用的小分子抑制劑篩選，助力抗癌藥物的研究與開發：
Keap1-Nrf2抑制劑篩選試劑盒旨在利用熒光偏振（fluorescence polarization，FP）技術，通過監測熒光標記分子與配體結合時的旋轉運動性變化，來鑒定Keap1-Nrf2結合抑制劑。FP是一種用于研究分子相互作用的強大工具。該試劑盒包含足夠量的純化Keap1蛋白、熒光標記Nrf2肽和用于100個結合反應的試劑緩沖液。為了確定抑制劑對Keap1-Nrf2復合物形成的影響，將Keap1蛋白和熒光Nrf2肽與或不與測試抑制劑一起孵育30分鐘。使用能夠測量熒光偏振的多功能微孔酶標儀測量Nrf2肽的旋轉運動性變化。
| 貨號 | 名稱 | 規格 | 說明 |
| 72020 | Keap1-Nrf2抑制劑篩選試劑盒
KEAP1-Nrf2 Inhibitor Screening Assay Kit |
96reactions | 非常適合研究酶動力學和篩選藥物發現和高通量應用的小分子抑制劑 |
結果賞析：
左圖：Keap1與Nrf2的結合。右圖：Nrf2抑制劑抑制Keap1-Nrf2結合。
結合情況使用Keap1:Nrf2抑制劑篩選試劑盒（BPS Bioscience #72020）進行檢測。Nrf2抑制劑KI696與Nrf2肽和Keap1在逐漸增加的濃度下孵育。熒光偏振度在λex 485nm，λem 530 nm下使用熒光偏振的多功能微孔酶標儀測量。
文獻案例：
在這項研究中，報道了一種新的6-shogaol衍生物（shogaol噻吩化合物（STC）），通過多種機制（KEAP1獨立和依賴）改善了其NRF2活性，降低了與巰基的反應性（可能改善了其生物作用的選擇性并減少了毒性），并在肝臟微粒體中具有代謝穩定性。使用可重復使用的催化劑（脯氨酸-脯氨酸二肽）采用新的合成方法，在良好的產率（>85%）和純度（~95%）下合成了STC。STC具有良好的藥物樣性質和生物活性，優于6-shogaol。與6-shogaol相比，STC表現出更顯著的抗炎作用，通過NRF2依賴和NRF2非依賴機制（未來的研究應進一步闡明這一方面）。在該研究中，他們就是用的BPS Bioscience Keap1-Nrf2相互作用的抑制劑篩選試劑盒來確定STC在抑制KEAP1-NRF2相互作用方面的效果的。
BPS Bioscience，生物酶研究專家，可提供活性酶、蛋白酶活性/抑制劑篩選檢測試劑盒、慢病毒等，產品涉及臨床前藥物開發過程的每個階段，包括磷酸酶、組蛋白去甲基化酶、組蛋白甲基化轉移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶（PARP）等熱門指標的蛋白酶及酶活/抑制劑篩選檢測試劑盒。
